啤酒酵母是否纯正,对啤酒发酵和啤酒质量有着很大的影响,这就要求生产上使用的酵母必须经过纯种扩大培养,使细胞数量达到一定要求后才能用于啤酒发酵。而且每个啤酒厂都应保存具有本厂特色的纯种酵母,以保证生产的啤酒具有稳定的风格和特性。

啤酒酵母扩大培养的工艺流程如下:
斜面试管(原菌种)→富氏瓶或试管培养→巴氏瓶或三角瓶培养→卡氏罐培养→汉生罐培养→酵母扩大培养罐→酵母繁殖槽→发酵池或发酵罐
以上流程中从斜面试管到卡氏罐培养为实验室扩大培养阶段,汉生罐以后为生产现场扩大培养阶段。
(1)斜面试管 一般是啤酒厂保藏的纯粹原菌或由科研机构和菌种保藏单位供给。
(2)富氏瓶培养 富氏瓶内装麦汁10mL,灭菌后备用。将种酵母用接种针或巴氏滴管接种于富氏瓶中在25~27℃培养箱中,培养2~3天,每天定时摇动,使沉淀的酵母均匀分布到培养基中。富氏瓶小而高,容易倾倒,使用不便,可用20ml 试管代替。
(3)巴氏瓶培养 在500~1000mL的巴氏瓶中,加入250~500mL的麦汁,加热煮沸,使瓶内蒸汽从侧管喷出,30min后,吸去弯管内的冷凝水,塞上棉塞,冷却备用。
在无菌室内,将已经培养成熟的富氏瓶或试管酵母培养液由侧管接种入巴氏瓶中,在25℃条件下培养2天。为了使酵母逐渐适应低温环境,也可将培养温度调节至20℃左右,培养时间也相应延长至3天左右。巴氏瓶也可用三角瓶或平底烧瓶代替。
(4)卡氏罐培养 卡氏罐容量一般为10~20L,加入5~10L麦汁,加热煮沸灭菌,冷却备用。加热灭菌时,先拔去侧管的玻璃塞,使蒸汽从侧管和弯曲管喷出30min,停止加热,然后塞上玻璃塞,吸去弯曲管内的冷凝水。麦汁中添加1L无菌水,以补充蒸发掉的水分。
卡氏罐一般接入1~2个巴氏瓶的酵母液,在25℃保温培养2~3天;或在15~20℃下培养3~5天,即可供生产现场的扩大培养之用。
(5)汉生罐培养 在卡氏罐培养后,酵母进入生产现场扩大培养阶段,扩大培养的方法可根据工厂具体条件进行。大型啤酒厂一般都设有汉生罐培养设备,酵母可在汉生罐保种,反复培养,连续使用1年左右。
汉生罐培养系统由1只麦汁杀菌罐和1~2只酵母培养罐组成,容量为150~260L。各罐均设冷却和保温用夹套和手摇搅拌器。
培养时,先将由冷却室来的100L麦汁在麦汁杀菌罐于100℃下杀菌60min,冷却至10~12℃,用压缩空气压入预先经30~60min灭菌的汉生罐内,再用压缩空气将卡氏罐内的酵母种液压人汉生罐,通风5~10min。24h后,用已灭菌的麦汁(约180L)将汉生罐加满,再通风5~10min,保持品温10~13℃,室温维持13℃。约经48h(由汉生罐留种再培养的需24h)培养至旺盛期,即可将其移接至酵母扩大培养罐。
汉生罐酵母培养液移接至扩大培养罐时,可留下20L左右于罐内,再加入灭菌麦汁至180L,准备下次扩大培养用。保存种酵母的室温一般控制在2~4℃。每1~2个月换一次麦汁,正常情况下可连续使用1~2年。
(6)酵母扩大培养罐 管道和培养罐经严格灭菌后,接入汉生罐培养液,并添加14~16℃的麦汁400~500L,次日待发酵旺盛期再追加12~15℃的麦2000~2300,24h后将培养液移至酵母繁殖槽。
(7)酵母繁殖槽 酵母扩大培养罐的培养液移至繁殖槽后,添加10~12℃麦汁2500L,24h后追加8~10℃麦汁4500L,再经24h,将此10000L培养液均分于两个繁殖槽,并以8~10℃麦汁将两槽添满至10000L,20~24h后移入发酵池或发酵罐。酵母扩大培养过程结束。
(8)酵母简易扩大培养法 在没有汉生罐培养系统的小型啤酒厂,可利用酵母繁殖槽进行简易扩大培养,方法如下:将种酵母扩大培养到卡氏罐,当发酵旺盛时,转入小型的酵母繁殖槽,添加18~20℃麦汁30~50L,经24~36h发酵后,再添加15~18℃麦汁100~150L,24~36h后,再添加1~15℃麦汁250~300L,在室温10~13℃下发酵24~36h,再加入10~12℃麦汁500~600L,经36~48h倒入发酵池,共约1000L发酵液,随即加入7~8℃麦汁1000~1500L,并保持9℃以下温度进行发酵约7~8天。
这种方法较简单,但要严格做好环境卫生和工艺卫生。如需缩短培养时间和扩大次数,每次追加麦汁的量可以增加一些(稀释倍数一般不宜超过5倍),但增殖时间也需延长。如果发酵池的容量较大,可以考虑同时培养2~4个卡氏罐,按比例追加麦汁。

