酵母扩大培养最关键的因素是环境与设备无菌，麦汁组成良好，追加时机和倍数合理。
在实际生产中，有时会遇到这种情况，追加麦汁后酵母起发特别缓慢，甚至经过2~3天仍无起发迹象。针对这种情况，首先要检查麦汁组成是否正常，尤其是α-氨基氮的含量是否偏低，温度控制和追加倍数是否合理。同时要取样进行镜检，正常情况下追加1天后，种子罐中酵母出芽率为35%~40%，开放式繁殖槽中酵母出芽率为20%~30%，追加后的培养液中酵母细胞数不低于（6~8）×106cfu/mL并检查酵母细胞死亡率，正常情况下死亡率不高于1%。必要还要检查培养液是否污染了杂菌，若已染菌，则坚决弃之不用。方法是将培养液升温至80℃以上，保持60min，冷却后排放，并对所有管路及设备彻底灭菌，经检查达到无菌条件后方可重新进行扩大培养。
若未发现杂菌感染，则可适当增加通风量，如经10~16h仍未起发，可补加一定数量的前一步处于增殖旺盛期的培养液，一般在补加后12h即可起发，同时要继续跟踪检查。
